响应面法优化蛹虫草多肽提取工艺研究

响应面法优化蛹虫草多肽提取工艺研究

响应面法优化蛹虫草多肽提取工艺研究

【摘要】目的：对蛹虫草多肽提取工艺进行了优化研究；方法：以蛹虫草子实体提取多肽为对象，通过box-behnken设计星点响应面实验进行优化实验；结果：优化蛹虫草多肽提取工艺为提取最佳时间为5.39小时，加酶量1.65%，底物浓度9.3%，蛹虫草多肽提取的od值为0.85g/l；结论：经实验得证，通过星点响应面实验方法进行蛹虫草多肽提取工艺条件优化，结果合理有效，优化效果良好。

【关键词】蛹虫草；响应面；工艺优化

响应面面优化实验则能够对多因素多水平筛选最优条件，获得理想的结果，是目前优化工艺中常用的优化方法[3]。本文通过设计星点box-behnken响应面实验，以蛹虫草为对象，对多肽提取方法条件进行了优化研究。

1 材料与方法

1.1 实验材料

虫草子实体（沈阳妮子北冬虫夏草种植基地）。

1.2 试剂

胃蛋白酶（活力：30003500u・mg-1）、胰蛋白酶（活力：250u・mg-1），均购自北京鼎国昌盛生物技术有限公司，石油醚（30～60℃），茚三酮。

1.3 北冬虫夏草多肽的提取工艺

脱脂：将北冬虫夏草子实体粉碎，取定量粉末，按1：3（w：v）比例加入石油醚，在55℃恒温下振荡3h，过滤，将滤渣烘干获得脱脂粉。

酶解过程：取3g北冬虫夏草脱脂粉，按底物浓度不同加入一定量蒸馏水，常温静置30min。用naoh溶液或hc1溶液调节至酶的最佳ph水平，按加酶量不同加入定量蛋白酶，将样品置恒温振荡器中进行水解。水解结束后，样品煮沸10min，使酶失活，冷却，4500r・min-1离心10min，取上清液备用。

1.4 实验仪器

thz-c恒温振荡器（太仓市实验设备厂），uv-2550型紫外可见分光光度计（岛津国际贸易有限公司）54308低温高速离心机（美国eppend

orf公司），al204电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）。

1.5 星点设计

本研究根据星点设计原理，利用design-expert.8.06软件，对蛹虫草多肽提取工艺：时间（因素a）、加酶量（因素b）、底物浓度（因素c）m行了优化试验。本试验采用三因素三水平对提取工艺进行优化，因素水平见表1，并对所得数据进行二次回归拟合，求得回归方程。

2 结果与分析

2.1 elisa响应面优化实验设计

蛹虫草于2009年被批准成为新资源食品,提取成分被用于食药两用,未提取的草体目前仅见于用于食品及保健食品领域,其中的提取成分蛹虫草菌粉被用于药·品领域！
[1]蛹虫草在保健品领域的应用请见方解蛹虫草保健品 栏目中详细介绍目前蛹虫草在保健品领域的应用！
冬·虫·夏·草为藏药材，食用需要谨慎或在医生的指导下服用，目前冬·虫·夏·草仅限用于药·品.
[1]冬·虫·夏·草在药·品领域的应用请见方解冬·虫·夏·草·药·品 栏目中详细介绍目前冬·虫·夏·草在药·品领域的应用！

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欢迎企业及个人投稿，我们将择优在相关频道审核通过，让更多的人找到您！自从2016年初，冬·虫·夏·草被限定用于药·品，本站所有频道及栏目中提到的冬·虫·夏·草食疗方及美食方法,请在医生的指导下使用。
最常见的提问：虫草子实体、不老草、蛹虫草、北虫草、虫草花、北冬·虫·夏·草是一样的吗？答案：是一样的,是一种新型食品,通过提取发现其中有能增加免疫力的有效成分被用于保·健·品及药·品,其中对于治疗疾病蛹虫草菌粉被用于药·品领域,请不要反复询问谢谢！

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