响应面法优化蛹虫草多肽提取工艺研究
响应面法优化蛹虫草多肽提取工艺研究
【摘要】目的:对蛹虫草多肽提取工艺进行了优化研究;方法:以蛹虫草子实体提取多肽为对象,通过box-behnken设计星点响应面实验进行优化实验;结果:优化蛹虫草多肽提取工艺为提取最佳时间为5.39小时,加酶量1.65%,底物浓度9.3%,蛹虫草多肽提取的od值为0.85g/l;结论:经实验得证,通过星点响应面实验方法进行蛹虫草多肽提取工艺条件优化,结果合理有效,优化效果良好。
【关键词】蛹虫草;响应面;工艺优化
响应面面优化实验则能够对多因素多水平筛选最优条件,获得理想的结果,是目前优化工艺中常用的优化方法[3]。本文通过设计星点box-behnken响应面实验,以蛹虫草为对象,对多肽提取方法条件进行了优化研究。
1 材料与方法
1.1 实验材料
虫草子实体(沈阳妮子北冬虫夏草种植基地)。
1.2 试剂
胃蛋白酶(活力:30003500u・mg-1)、胰蛋白酶(活力:250u・mg-1),均购自北京鼎国昌盛生物技术有限公司,石油醚(30~60℃),茚三酮。
1.3 北冬虫夏草多肽的提取工艺
脱脂:将北冬虫夏草子实体粉碎,取定量粉末,按1:3(w:v)比例加入石油醚,在55℃恒温下振荡3h,过滤,将滤渣烘干获得脱脂粉。
酶解过程:取3g北冬虫夏草脱脂粉,按底物浓度不同加入一定量蒸馏水,常温静置30min。用naoh溶液或hc1溶液调节至酶的最佳ph水平,按加酶量不同加入定量蛋白酶,将样品置恒温振荡器中进行水解。水解结束后,样品煮沸10min,使酶失活,冷却,4500r・min-1离心10min,取上清液备用。
1.4 实验仪器
thz-c恒温振荡器(太仓市实验设备厂),uv-2550型紫外可见分光光度计(岛津国际贸易有限公司)54308低温高速离心机(美国eppend
orf公司),al204电子天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)。
1.5 星点设计
本研究根据星点设计原理,利用design-expert.8.06软件,对蛹虫草多肽提取工艺:时间(因素a)、加酶量(因素b)、底物浓度(因素c)m行了优化试验。本试验采用三因素三水平对提取工艺进行优化,因素水平见表1,并对所得数据进行二次回归拟合,求得回归方程。
2 结果与分析
2.1 elisa响应面优化实验设计
蛹虫草于2009年被批准成为新资源食品,提取成分被用于食药两用,未提取的草体目前仅见于用于食品及保健食品领域,其中的提取成分蛹虫草菌粉被用于药·品领域!
[1]蛹虫草在保健品领域的应用请见方解蛹虫草保健品 栏目中详细介绍目前蛹虫草在保健品领域的应用!
冬·虫·夏·草为藏药材,食用需要谨慎或在医生的指导下服用,目前冬·虫·夏·草仅限用于药·品.
[1]冬·虫·夏·草在药·品领域的应用请见方解冬·虫·夏·草·药·品 栏目中详细介绍目前冬·虫·夏·草在药·品领域的应用!
响应面法优化蛹虫草多肽提取工艺研究end
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最常见的提问:虫草子实体、不老草、蛹虫草、北虫草、虫草花、北冬·虫·夏·草是一样的吗?答案:是一样的,是一种新型食品,通过提取发现其中有能增加免疫力的有效成分被用于保·健·品及药·品,其中对于治疗疾病蛹虫草菌粉被用于药·品领域,请不要反复询问谢谢!
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