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蛹虫草粗提物体外抗氧化实验研究

分类:虫草文献 作者:阳光虫草 评论:0 热度: 6,821 ℃

阳光虫草

蛹虫草粗提物体外抗氧化实验研究

蛹虫草粗提物体外抗氧化实验研究

摘要:蛹虫草(cordyceps militari s)又名北冬虫夏草或北虫草。

1实验材料与方法

1.1材料蛹虫草,购自盐城神农保健食品有限公司。

1.2仪器电子精密天平、数显恒温水浴锅(HH-4)、超速冷冻离心机,GZX-9070 MBE电热恒温鼓风干燥箱等。

1.3试剂DPPH,sigma公司,其他试剂均为国产分析纯。

1.4方法

1.4.1蛹虫草粗体物制备提取方法:将蛹虫草子实体粉碎,按料液比1:30加水提取,提取三次,合并提取液,浓缩至一定体积,加3倍95%的乙醇沉淀,取上清液浓缩、干燥,得粗提物备用。

1.4.2还原力的测定[10]

1.4.3清除超氧阴离子自由基(O2-?)实验[11]

1.4.4清除羟基自由基实验[12]

1.4.5模拟胃液pH条件下的NO2-清除反应作用[13]1.4.6 DPPH法测定蛹虫草粗提物抗氧化活性[14]2结果与分析2.1还原力的测定还原力的原理:样品将铁氰化钾(K3Fe(CN)6)还原成亚铁氰化钾(K4Fe(CN)6),亚铁氰化钾再与Fe3+作用,生成亚铁氰化铁(普鲁士蓝),以在700nm波长处检测普鲁士蓝的吸光度表示还原力的大小,吸光度越高,样品的还原力就越强,抗氧化性越强。因此,可通过测定还原力来说明其抗氧化活性的大小。

由图1可以看出,随浓度的增加,蛹虫草粗提物的还原力逐渐增强,浓度为2mg/ml、5mg/ml、7mg/ml、14mg/ml、28mg/ml的蛹虫草粗提物的吸光值分别为0.186、0.852、1.136、1.246、1.492。2.2清除超氧阴离子实验在体外产生超氧阴离子自由基(O2-?)的反应体系中,分别加入不同浓度的蛹虫草粗提物,分别为2、5、7、14、28mg/ml。由图2可见,在2-5mg/ml浓度间,蛹虫草粗提物对(O2-?)的清除作用随着浓度的增高较为明显;而浓度高于5mg/ml时,清除率变化不是很明显。35)%(率除清3025201510虫草素提取液050 5 10 15 20 25 30浓度(mg/ml)图2不同浓度下蛹虫草粗提物清除超氧阴离子的效果2.3清除羟基自由基的实验FeSO4与H2O2反应产生?OH,在体系内加入水杨酸,可捕捉羟基自由基并产生有色物质,该物质在510nm处有最大吸收,当反应体系中存在?OH自由基清除剂时,此氧化过程受到抑制,吸光度值则降低。从图3知,蛹虫草粗提物对羟基自由基的效果极为明显,在2mg/ml的浓度时,清除率就可以达到50%以上,随后浓度的增加,清除率仍然可以提高,显示其较强的清除能力。90虫草素提取液)%(率除清80706050403020100虫草素提取液0 5 10 15 20 25 30浓度(mg/ml)图3不同浓度下蛹虫草粗提物清除羟基自由基的能力2.4模拟胃液pH条件下的NO2-清除反应作用清除亚硝酸盐是有效防止N-亚硝基化合物致癌的途径之一。由图4可知,在2-14mg/ml之间,清除亚硝酸盐与粗提物浓度的增加存在一定的量效关系,当超过14mg/ml,清除率出现了)mn007(度光吸1.61.41.20.810.60.40.200 5 10 15 20 25 30浓度(mg/ml)图1不同浓度下蛹虫草粗提物的还原力114 JILIN AGRICULTURE减弱的趋势。706050)%40(率除清3020100虫草素提取液0 5 10 15 20 25 30浓度(mg/ml)图4不同浓度下蛹虫草粗提物对NO2-清除作用2.5 DPPH法测定蛹虫草抗氧化活性DPPH?在有机溶剂中是一种稳定的自由基,广泛用于抗氧化评价体系中。图5的结果表明,清除率与浓度之间存在明显的量效关系。随着蛹虫草粗提物浓度的增加,清除率增加极为明显,表明蛹虫草粗提物具有很好的抗氧化能力。7060504030201000 5 10 15 20 25 30抑制率(%)虫草素提取液图5不同浓度蛹虫草粗提物对DPPH的清除效果浓度(mg/ml)3讨论正常情况下,机体中自由基的产生和清除处在一个动态的平衡。当运动或力竭运动时,机体产生的自由基增多,超过机体本身抗氧化酶系和抗氧化物质的清除能力,自由基就会攻击细胞膜系统,影响结构和功能,对机体造成损害[15]。这时补充外源性抗氧化物质,提高机体清除自由基的能力显得尤为重要。具有抗氧化作用的物质有很多,包括天然的和人工合成的。对于运动员这个特殊人群来说,天然产物既安全又有效,作为功能食品的首选。其中食药用真菌就是抗疲劳、抗氧化比较显著的一类。李野[16]等人研究发现灵芝孢子粉能显著降低力竭小鼠肝脏MDA的含量,提高SOD、GSH-Px酶的活性,从而对运动引起的自由基的过量产生而导致的氧化作用的发生有明显的延缓;同时孢子粉能显著降低力竭运动造成的小鼠血清GPT、CK等酶活性的过度升高,提示孢子粉可以减轻力竭运动对小鼠肝脏等组织的损伤。杏鲍菇粗多糖可明显提高小鼠安静时肝脏、骨骼肌GSH-Px活性,降低力竭游泳对小鼠肝脏、骨骼肌的损伤程度,对小鼠肝脏、骨骼肌有明显的抗氧化、抗损伤功效[17]。黑木耳粗多糖也具有类似的功效[18]。本文主要通过体外的氧化反应体系评价了蛹虫草粗提物的抗氧化作用。还原力测定结果表明,随着粗提物浓度的增加,还原力越来越强,呈量效关系;蛹虫草粗提物对超氧阴离子自由基的清除作用在低浓度情况下,增幅较为明显,浓度稍高时,清除力没有太大的变化;蛹虫草粗提物对羟基自由基的清除作用最为明显,在2mg/ml的浓度时,清除率就已经达到55%;粗提物浓度在14mg/ml之前NO2-清除作用存在比例关系,超过这个浓度,清除作用反而受到一定抑制;对DPPH的清除作用就呈现一个较为明显的线性关系。实验结果表明蛹虫草粗提物具有明显的体外抗氧化作用,粗提物体内抗氧化、抗损伤作用如何以及抗氧化的具体功效成分是什么,有待进一步深入研究。蛹虫草粗提物体外抗氧化实验研究@王继健$南京体育学院$南京晓庄学院生物化工与环境工程学院!江苏南京210000蛹虫草(Cordyceps militaris)又名北冬虫夏草或北虫草,与冬虫夏草同属异种,属于子囊菌亚门麦角菌科虫草属真菌。蛹虫草富含多种功能活性物质,其中以虫草多糖的研究最为深入。具有抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤等作用,除虫草多糖外,蛹虫草中还有其他功效成分,如虫草素。文章通过体外抗氧化实验的方法进一步筛选出蛹虫草中其他的抗氧化成分,为进一步研究和开发利用蛹虫草提供相关的数据。蛹虫草;;粗提物;;体外抗氧化[1]邵力平.真菌分类学.北京:中国林业出版社,1984,109. [2]王蕾,于荣敏,张辉,等.人工培养蛹虫草多糖的分离纯化及其结构的初步研究[J].中国生化药物杂志,2003,24(1):23-25. [3]Rongmin Yu,Liyan Song,Yu Zhao,et al(2004).Isolation and biological properties of polysaccharideC P S-1 f r o m c u l t u r e d C o r d y c e p s m i l i t a r i s.Fitoterapia,75,465-472. [4]Rongmin Yu,Wei Yang,Liyan Song,et al(2007).Structural characterization and antioxidant activitya polysaccharide from the fruiting bodies of culturedCordyceps militaris.Carbohydrate Polymers,70,430-436. [5]Rongmin Yu,Yin Yin,Wei Yang,et al(2009).Structural elucidation and biological activity of anovel polysaccharide by alkaline extraction from culturedCordyceps militaris.Carbohydrate Polymers,75,166-171. [6]王琦,韩晓龙.蛹虫草对老年大鼠自由基代谢影响的研究[J].辽宁师专学报,2002,4(4):104-106. [7]贡成良,潘中华,郑小坚,等.家蚕蛹虫草的延缓衰老作用研究[J].苏州大学学报:工科版,2005,25(2):24-27. [8]王菊凤,李鹄鸣.蛹虫草多糖对果蝇种群期望寿命的影响[J].湖南农业科学,2010,(9):133-135,139. [9]沈齐英,沈秋英.北虫草抗氧自由基和羟自由基作用的研究[J].广西植物,21(3):252-254. [10]Oyaizu M.Antioxidant activity of browingproducts of glucosamine fractionated by organic solventand thin layer chromatography[J].Nippon Shokuhin KogyoGakkaishi,1986,35:771-775. [11]张宏.四种邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶活性方法的比较[J].内蒙古大学学报,2002,33(6):677-681. [12]李平.山茱萸多糖PFCCⅠ抗氧化性能研究[J].食品工业科技,2003,24(5):36-39. [13]谢祥茂,丁晓雯,陈俊琴.金樱子提取液对NO-2消除作用的体外实验研究[J].食品科学,2001,22(1):12-14. [14]王和才,胡秋辉.DPPH法测定紫红薯提取物清除自由基的能力[J].食品研究与开发,2010,31(1):132-135. [15]SLATER T F.Free radical mechanisms in tissueinjury[J].Biochemical J,1984,222(1):1-15. [16]李野,刘祥燕,娄雪.灵芝孢子粉对力竭小鼠抗氧化、抗损伤的作用[J].吉林体育学院学报,2008,24(5):76-77. [17]史亚丽,杨立红,蔡德华,等.杏鲍菇多糖对力竭小鼠抗氧化、抗损伤的作用[J].体育学刊,2005,12(1):56-58. [18]史亚丽,姜川,杨立红,等.黑木耳粗多糖对力竭小鼠抗氧化能力的影响[J].现代预防医学,2008,35(24):4845-4847.

蛹虫草于2009年被批准成为新资源食品,提取成分被用于食药两用,未提取的草体目前仅见于用于食品及保健食品领域,其中的提取成分蛹虫草菌粉被用于药·品领域!
[1]蛹虫草在保健品领域的应用请见方解蛹虫草保健品 栏目中详细介绍目前蛹虫草在保健品领域的应用!
冬·虫·夏·草为藏药材,食用需要谨慎或在医生的指导下服用,目前冬·虫·夏·草仅限用于药·品.
[1]冬·虫·夏·草在药·品领域的应用请见方解冬·虫·夏·草·药·品 栏目中详细介绍目前冬·虫·夏·草在药·品领域的应用!

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欢迎企业及个人投稿,我们将择优在相关频道审核通过,让更多的人找到您!自从2016年初,冬·虫·夏·草被限定用于药·品,本站所有频道及栏目中提到的冬·虫·夏·草食疗方及美食方法,请在医生的指导下使用。
最常见的提问:虫草子实体、不老草、蛹虫草、北虫草、虫草花、北冬·虫·夏·草是一样的吗?答案:是一样的,是一种新型食品,通过提取发现其中有能增加免疫力的有效成分被用于保·健·品及药·品,其中对于治疗疾病蛹虫草菌粉被用于药·品领域,请不要反复询问谢谢!

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