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蛹虫草的规范化栽培技术

分类:虫草文献 作者:阳光虫草 评论:1 热度: 27,872 ℃

阳光虫草

虫草的规范化栽培技术

蛹虫草的规范化栽培技术

摘 要:蛹虫草又称蛹草、北虫草、北冬虫夏草等,在真菌分类中与冬虫夏草隶属于子囊菌亚门、核菌纲、麦角菌目、麦角菌科、虫草属,是一种虫或蛹与菌的结合体。蛹虫草与冬虫夏草一样,具有很高的营养价值和药用价值。由于天然虫草资源的不够,为了保护生态环境,许多学者进行了人工培栽培虫草的试验研究。其中,尤以蛹虫草的研究和应用最多。本文从品种的选择、栽培与管理等方面,介绍蛹虫草的规范化栽培技术。

关键词:蛹虫草;规范化;栽培技术

虫草通常有两种含义,一种含义是指:虫草属中最为著名的冬虫夏草;另一种含义是指:虫草是指虫草属中所有的真菌,如冬虫夏草、蛹虫草、古尼虫草、蝉花虫草等。

虫草属菌类,是真菌在冬天寄生在昆虫的幼虫、蛹、成虫体内,在虫体内生长繁殖,让虫体成为充满菌丝的僵虫,次年环境适宜时虫体长出有柄的头状或棒状子座,是虫与草的复合体。

虫草种类较多,据报道全世界大约有400多种。在虫草属中蛹虫草是这个属中专化性不强的种,能广泛侵染鳞翅目、鞘翅目等2000多种昆虫的幼虫、蛹、成虫,以蛹较为常见。同时,也可以在人工培养基上生长,如大米培养基。因此,蛹虫草的人工栽培既可以用大米培养基进行,其产品为蛹虫草的子座;也可用柞蚕、桑蚕的蛹和马尾松毛虫的成虫和幼虫等进行,能获得包括寄主在内的蛹虫草子实体(下次介绍)。

蛹虫草原为野生,主要产于高海拔地区及树木丛生的深山老林,产量少,远不能满足人们的消费需求。我国于1986年开始人工栽培,以大米培养基为主的栽培技术,已在全国许多地方试验成功,这为蛹虫草的规范化生产奠定了技术基础。笔者拟就介绍多年来从事蛹虫草栽培的一些经验和体会,以同各界朋友交流,共同提高蛹虫草的规范化栽培技术及产品品质。

一、菌种选育与复壮

人们在蛹虫草栽培中遇到的难题,是蛹虫草菌种的退化显著,优良性状不能稳定遗传。笔者选育的一个较好菌株,使用得好的话,可保持一到两年优质高产;否则,使用半年左右,甚至是转种几代后菌种就严重退化,其特征为不长子实体或只长出极少量子实体,而且质量极差。因此,掌握成熟的菌种选育与复壮技术,是实现蛹虫草规范化栽培的前提条件。

1.菌种选育

一般采用组织分离法进行菌种选育,此法具有操作方便,菌丝萌发快,能保持原菌种的优良种性等特点。

(1)选优良菌株。从野外或者室内选生长健壮、大小适中、无病虫害八成熟的、第一批优良蛹虫草菌株。

(2)消毒。将鲜蛹虫草用清水洗去外表泥土,用75%酒精浸泡3~5秒钟,无菌水冲洗2~3次,再用0.1%升汞水溶液消毒l~3分钟,用无菌水冲洗3~5次,洗净后进行分离。从室内选的菌株仅需酒精消毒,无菌水冲洗即可。

(3)分离。纵剖有龟背状花纹的蛹虫草顶端组织子实体,用尖头镊子取内部白色组织块,取绿豆粒大的组织接种到已消毒的斜面培养基中部。

(4)培养。把已接种的斜面培养基放在培养室培养,培养室杀菌消毒,避光,保持培养室的温度25℃左右,空气湿度60%左,经常检查,把污染的去除,培养5~10天,菌种已培养好,挑选性状优良的菌种作为母种。

(5)优良菌种标准。白色菌丝粗壮浓密,且紧贴培养基匍匐状生长,边缘整齐,气生绒毛状菌丝少,见光后菌丝变为橘黄色。

2.菌种提纯

(1)消毒。将优良母种和已消毒的斜面培b基试管放入超净工作台内。先用肥皂洗净双手,再用75%酒精棉球擦手和菌种管表面,在酒精灯火焰上灼烧消毒。

(2)转管。转管时两手从接种孔伸入超净工作台内,75%酒精棉球擦拭接种环。左手持菌种管和斜面管,两支试管口对齐于火焰上方。右手持接种环,并将其在酒精灯火焰上干热灭菌,用小指及无名指拔掉棉塞,使棉塞底部朝外。接种环冷却后伸入菌种管内取黄豆粒大并带有薄薄培养基的菌丝块,迅速移入斜面培养基的中部,菌丝朝上。然后,将棉塞在火焰上烧一下,立即塞入试管口,旋紧棉塞。

接种环不要触碰管口及管壁,以防感染。适温培养5~10天左右即可。

3.出草实验

将提纯菌种,在无菌条件下接种到培养基上,在培养室培养。在温度为18~22℃,湿度适宜的条件下培养20~30天,即可形成橙红色子实体。经鉴定,选优良菌种进行生产。

4.菌种复壮

菌种繁殖应无性繁殖与有性繁殖交替进行,否则菌种性状易退化,其表现为出草不整齐、畸形,甚至不出草。因此,在生产过程中应及时对菌种进行有性繁殖来提纯复壮。

(1)消毒。选取高产、优质、早熟的蛹虫草子实体消毒。

(2)接种。将消毒的子实体悬挂于装有pda培养基的无菌三角瓶内。

(3)培养。接种的三角瓶在25℃左右条件下,在无菌室静置培养一天,当三角瓶的培养基表面出现大量蛹虫草的白色菌丝时,在超净工作台上挑取单个或多个菌丝,用接种环接种到试管斜面培养基中部进行培养。当蛹虫草菌丝布满斜面后再提纯。获得的母种经出草试验后,选择优质蛹虫草子实体再进行组织分离法培养,获取的母种可以扩繁栽培种。

二、培养基的制作与灭菌

1.液体培养基

液体培养基常见的有采用摇床来生产的摇瓶培养法和采用发酵罐来生产的深层培养法。现介绍摇瓶培养法。

(1)液体培养基的配制与灭菌

①配方。磷酸二氢钾2g,硫酸镁1g,柠檬酸铵1g,葡萄糖30g,蛋白栋3g,维生素b150mg,马铃薯营养液200ml定容至1000ml。

②摇瓶振荡培养。把配好的液体培养基装入锥形瓶中,每瓶装150毫升,瓶口用棉塞、牛皮纸密封。

③灭菌。高压灭菌,把已经装好营养液体的三角瓶放在高压灭菌锅内,当压力表读数为0.1~0.15mpa时,即121℃,灭菌15~30min。 ④接种。灭菌后的三角瓶在无菌条件下接入2~4块约1cm2的斜面菌种,于23℃~25℃下静置培养24h。

⑤培养。菌丝萌发时放置在摇床上振荡培养,振荡频率为每分钟80~130次。摇床的温度控制在23℃~25℃,培养时间因菌类不同而异,一般是5天左右。将振荡好的培养基倒入大容器里,经过扩容后,在无菌条件下安装通气管,用输氧机通入适量氧气后培养48小时即可。若没有输氧机,振荡培养一周左右也可。

⑥培养结束的标准。营养液清澈透明,其中悬浮着大量小菌丝球,并伴有菌类特有的香味。

2.大米培养基

(1)大米培养基的制作。据试验,蛹虫草的培养基,其配方为大米加营养液,以350ml玻璃广口瓶作为培养瓶,按培养基配方,先称大米,要求大米新鲜、无霉变、无污染,最好是杂交米,在天平上称30克大米,倒入培养瓶中,加入35ml左右液体培养基,大米与营养液的比例要适当,不能太干或太湿,适宜的含水量为60%左右。瓶口用透气的封口膜封好,外用牛皮纸包好。

(2)大米培养基的灭菌。高压灭菌,当压力表读数为0.1~0.15mpa时,即121℃,保持1~1.5小时;常压灭菌8~10小时,常压灭菌时必须在3小时以内灶内温度达到100℃,否则培养基容易酸化变质,影响产量。

三、接种和培养

1.接种

培养基冷却到30℃以下时,在无菌条件下接种。在超净工作台上,将液体菌种接种到培养基上,方法是左手拿培养基,瓶口对酒精灯火焰,右手拿菌种瓶往培养瓶内注射菌种。若大批量生产可以采用专用接种枪,每瓶注射菌种5~10ml,接种完后培养瓶放在培养室的培养。

2.培养

接种后将栽培瓶置清洁避光处培养。发菌初期,为减少杂菌污染,保持室温15~18℃,待料面布满菌丝后,将温度调到20~23℃,空气相对湿度65%左右,空气新鲜。经15天左右培养,菌丝长满料瓶,完成营养生长。

四、出草管理

蛹虫草的出草对环境条件要求较严,环境因子控制得好,出草快,质量好,否则出草慢,甚至不出草。

1.控制好温度

蛹虫草是变温结实性菌类,对变温菌类而言,温度是所有环境因素中最重要的因素。蛹虫草出草的温度为10~25℃,适宜温度为18~22℃。出草如遇低温会产生畸形,影响产量和质量,温度在23℃以上时生长不良。人工培育过程中应保持恒温管理,只有在原基分化时期才适宜给较大昼夜温差刺激,温差保持在8~10℃左右。

2.适宜的湿度

湿度也是虫草生长的重要因素之一,它包括培养基湿度和空气相对湿度,培养基湿度为60%左右。采收第一批子实体后,培养基含水量下降至45%~50%,在转潮期补足水分,通常用营养液进行补水。子实体生长期间,特别是在中后期,要求空气相对湿度达到90%~95%,这样可以延迟蛹虫草的衰老,提高产量。一般出草到成熟需向瓶中注水3~4次。

3.通风良好

菌丝生长和子实体的发育均需保持良好的通风条件,当瓶子发满菌后,应立即进行通风,方法是用竹签在封口膜上刺几个圆孔通风,直到虫草成熟,同时每天开窗通风两次,每次30分钟。

4.光照适宜

光照是蛹虫草栽培的又一个重要因素。菌丝长满瓶后开始见光,但避免太阳光直射。原基形成和子实体生长发育需要较充足的散射光,光照强度保持在100~200勒克斯以上。原基形成时,要求较强的散射光刺激,且每天要求光照时数在10小时以上。但须防止昼夜连续光照,否则子实体将难以分化。室内栽培用日光灯补充光源,灯管距栽培瓶30~50cm。蛹虫草有较强的趋光性,在子实体形成后,经常调整光源的方向,以保证子实体直立生长,形成优质的棒状的子座。当子实体5~8cm时即停止生长,子实体成熟。

五、及时采收

当子实体成熟,头部出现龟裂状花纹,表面出现黄色粉末状物,及时采收。如采收过迟,则子实体枯萎或倒苗腐烂。采收时,用无菌手术镊子将子实体从培养基上摘下即可。采收后,停水3~4天后在瓶内注入营养液,包扎好瓶口,继续培养,10~20天左右,又可长出第二批。采后子实体要及时烘干,烘干的产品要存放到密闭的塑料薄膜袋内。

参考文献:

[1]刘振祥,张胜.食用菌栽培技术[m].北京:化学工业出版社,2007.

[2]陈顺志,吴佩杰.瓶栽蛹虫草子座的方法[j].生物学通报,1992(1).

[3]姜明兰,钟文田.北冬虫夏草人工栽培技术研究[j].辽宁农业科学,1995(1).

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